重生之玩遍女明星目录,庙中求子被僧人C燕氏,辣文小寡妇,性奴大乳清纯校花调教记

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      1. 外泌體研究

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        EIQ3外泌體提取試劑盒

        華盈生物自主開發的EIQ3外泌體提取試劑盒不僅有效提高了外泌體得率,同時能夠顯著減少雜蛋白殘留(如血清高豐度蛋白),相較于其他試劑盒,EIQ3應用于血漿外泌體全轉錄組測序的數據質量與超速離心更為接近。
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        產品描述

         

               經典的超速離心法(差速離心)、密度梯度離心法在外泌體制備過程中經常受到大型儀器的資源限制,并且操作復雜、耗時、外泌體得率也低。華盈生物自主研發的Exosome Isolation Q3(簡稱EIQ3)系列沉淀法外泌體提取劑盒,不僅有效提高外泌體得率,同時經過技術改良,能夠顯著減少雜蛋白殘留(如血清高豐度蛋白)。該試劑盒可以實現血清、血漿、尿液、細胞上清等液質樣本中外泌體的快速提取,為后期外泌體研究的數據穩定性和可靠性提供保障。

         

         
         

         

        |   EIQ3外泌體提取試劑盒-產品規格

        貨號                    適用樣本類型                                規格                  說明
        EIQ3-01001  血清 150 rxns  以200μL 血清樣本為一次反應
        EIQ3-02001  血漿、腦脊液 150 rxns  以200μL 血漿樣本為一次反應
        EIQ3-03001   尿液   10 rxns    以10mL 尿液樣本為一次反應
        EIQ3-04001  細胞上清、房水、腦脊液 10 rxns 以10mL 細胞上清樣本為一次反應

                          

                                點擊貨號,下載試劑盒說明書        點擊“紅色”產品名稱,查看參考文獻 

        |   EIQ3外泌體提取試劑盒-優勢

        ●  外泌體純度高(Quality)  

        ●  外泌體得率高(Quantity)

        ●  操作簡便,周期短(Quick)

        |   EIQ3外泌體提取試劑盒-操作流程

        |   EIQ3外泌體提取試劑盒 - 實用效果

               應用華盈生物EIQ3系列外泌體提取試劑盒提取的外泌體,可用于不同的外泌體鑒定實驗,包括電鏡觀察,NTA分析,Western Blot鑒定外泌體marker等。以下實測結果以血清/尿液外泌體提取數據為例進行展示和分析:

         

         

        EIQ3與超速離心等技術對比

        案例   EIQ3提取的外泌體進行全轉錄測序的結果與UC更為接近

               上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院的科研人員開展了一項研究(PMID: 32716349),系統地比較了多種商業化試劑盒與UC法提取血漿外泌體的差異,以為科研人員選擇商業化試劑盒提取外泌體提供的參考[6]。研究人員入組了9例癌癥患者(其中正常對照、早期患者、轉移患者各3例),將同組患者的血漿合并,總共得到3份血漿樣本,每組的血漿樣本分為6等分,分別采用5種商業試劑盒包括Wayen Exosome Isolation kit(WY,華盈生物EIQ3)、ExoQuick(SBI)、miRCURY Exosome Kits(Qiagen)、Ribo Exosome Isolation Reagent(Ribo)、Total Exosome Isolation (Fisher)和UC(ultracentrifugation)分離外泌體。最后,對分離得到的外泌體進行轉錄組測序,比較各種分離方法在測序結果上的差異(圖1)。

                                    圖1.各種外泌體提取試劑盒和超速離心方法的操作流程

               首先,各種試劑盒在提取的外泌體粒徑上并無明顯差異,檢測的外泌體粒徑均在100 nm左右(圖2A)。但相對其他試劑盒,Wayen Exosome Isolation kit在外泌體提取濃度上相對較高,1mL血漿樣本含有更多的外泌體顆粒,而UC提取的外泌體濃度在所有方法中相對較低(圖2B)。

                            圖2. 各種方法分離的外泌體粒徑和濃度的比較

               隨后,研究人員對提取的外泌體進行了RNA的建庫,Wayen Exosome Isolation kit提取的外泌體RNA在200-1000bp片段范圍內均得到更高的豐度(圖3)。

                  圖3.各種方法分離的外泌體evRNA文庫長度分布的比較

               接著,研究人員對比分析了各種試劑盒提取的血漿外泌體中各種類型RNA的比例,發現Wayen Exosome Isolation kit的表現和UC更為接近,所測得的short-noncoding RNA, pseudogene, long-noncoding RNA 及protein-coding genes比例基本相同,而其他試劑盒檢測結果與UC存在較大差異(圖4)。

                  圖4. 不同方法分離的外泌體中各類RNA的比例

               最后,關于各種方法提取的外泌體進行RNA的聚類分析,無論是Control組、primary組,還是metastatic組,同樣是Wayen Exosome Isolation kit提取的外泌體RNA與UC組更為接近(圖5)。

                  圖5. 不同方法分離的外泌體中RNA聚類分析

               總體來說,EIQ3提取的血漿外泌體在用于轉錄組分析上,其表現與UC更為接近。

               結合上述實驗結果,以及UC和EIQ3的分離特點,我們提出如下建議:

        1.  當我們樣本量較少的時候,UC得到的外泌體量會較少,可以考慮采用華盈生物EIQ3試劑盒;

        2.  當我們樣本量足夠,想要得到更多外泌體或者濃縮外泌體用于下游實驗的時候,可以考慮采用華盈生物EIQ3試劑盒;

        3.  當我們通過UC或者密度梯度離心獲得的高純度外泌體完成核酸或者蛋白組篩選后,進一步需要對個別分子進行驗證實驗的時候,采用華盈生物EIQ3試劑盒提取外泌體更方便,也更容易標準化。

        4.   針對外泌體核酸測序等實驗,采用華盈生物EIQ3試劑盒不僅能夠接近UC的外泌體得率問題,而且能夠獲得與UC更為接近的核酸譜。

         

        |   客戶文獻

        [1].  Zhang Zhengchuan, Xu Ruogu, Yang Yang, et al. Micro/nano-textured hierarchical titanium topography promotes exosome biogenesis and secretion to improve osseointegration. J Nanobiotechnology, 2021, 19: 78.

        [2]. Li Qijie, Fang Lu, Chen Junjie, et al. Exosomal MicroRNA-21 Promotes Keloid Fibroblast Proliferation and Collagen Production by Inhibiting Smad7. J Burn Care Res, 2021, 42: 1266-1274.

        [3]. Liu Huawei, Zhao Fan, Zhang Kai, et al. Lactobacillus plantarumInvestigating the growth performance, meat quality, immune function and proteomic profiles of plasmal exosomes in -treated broilers with immunological stress. Food Funct, 2021, 12: 11790-11807.

        [4]. Li Yun, Ji Jin, Lyu Ji, et al. A Novel Urine Exosomal lncRNA Assay to Improve the Detection of Prostate Cancer at Initial Biopsy: A Retrospective Multicenter Diagnostic Feasibility Study. Cancers (Basel), 2021, 13: undefined.

        [5].  Song Zhiqi, Xu Yanfeng, Zhang Ling, et al. Comprehensive Proteomic Profiling of Urinary Exosomes and Identification of Potential Non-invasive Early Biomarkers of Alzheimer's Disease in 5XFAD Mouse Model. Front Genet, 2020, 11: 565479.

        [6].  Peng C, J Wang, Bao Q, et al., Isolation of extracellular vesicle with different precipitation-based methods exerts a tremendous impact on the biomarker analysis for clinical plasma samples.  Cancer biomarkers : section A of Disease markers. 2020;29(3):373-385.

        關鍵詞:
        外泌體、超速離心、外泌體提取、外泌體得率
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        戰略合作

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        發布時間:2021-08-11 17:21:10

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