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      1. 外泌體研究

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        外泌體示蹤服務

        外泌體是細胞間溝通的橋梁,熒光標記的外泌體能夠可視化地追蹤外泌體與受體細胞結合乃至進入受體細胞內部后的動態分布情況,是發現外泌體相關生物功能背后作用機制的重要環節。
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        產品描述

               對于外泌體功能研究,一般先要觀察到外泌體被受體細胞攝取或到達目的組織和器官后,再檢測受體細胞、組織或器官中相應表型指標是否發生變化。因此,外泌體標記和示蹤是外泌體功能研究的基礎和關鍵步驟。華盈生物擁有完整的技術平臺和豐富的服務經驗,可以提供各種外泌體/凋亡小體的標記、體外細胞吞噬/熒光共聚焦和體內小動物成像等外泌體示蹤服務。

        |  外泌體示蹤技術簡介      

               目前已發表的外泌體文章中,外泌體大多使用親脂性染料進行標記,染料原理是親脂性熒光膜染料將脂肪族的長尾巴插入外泌體的脂質雙層中后發出穩定且持久的強熒光信號(以非共價方式嵌入),有助于觀察外泌體與受體細胞/組織/器官之間的相互作用,在體內和體外都有較多應用。

         

               常用的親脂性染料主要分為兩大類,第一類是PKH67(綠色熒光)/PKH26(紅色熒光),第二類是Di系列的親脂性染料,如DiL(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光)。這些染料可以穩定的與外泌體的膜脂質區結合并發出熒光,可以用于外泌體的功能學研究。

         

        1. 親脂性染料:PKH-67(綠色熒光)/PKH-26(紅色熒光)

              PKH系列染料具有毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠穿透細胞膜,熒光強而穩定等特點。其中PKH67的體內熒光半衰期為10-12天,相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,由于其熒光穩定性較強,在標記研究周期超過一周時,特別適用于外泌體示蹤研究。

        2. 親脂性羰花青染料

               DiL,DiR,DiO,DiD是一系列親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。這些環境敏感性熒光染料在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,其具有消光系數高、極性依賴性、激發態壽命短等特點。如DiR 是一種親脂性近紅外熒光膜染料,可穿透細胞和組織,在活體成像中用來示蹤。通過兩個18-碳鏈插入到脂膜,在水中微弱熒光,當摻入膜中時具有高熒光和相當好的光穩定性,實現特異性、穩定的膜染色。此外,近紅外熒光成像的背景干凈,可以避免生物體內在可見光范圍內自發熒光造成的背景干擾。

         

        |   外泌體示蹤產品

        |   外泌體示蹤流程      

         

        |   相關文獻

        [1]. Chen L, Wang Y, Li S, et al. Exosomes Derived from GDNF-Modified Human Adipose Mesenchymal Stem Cells Ameliorate Peritubular Capillary Loss in Tubulointerstitial Fibrosis by Activating the SIRT1/eNOS Signaling Pathway. Theranostics. 2020 Jul 25;10(20):9425-9442.

        [2]. Ren R, Sun H, Ma C, et al. Colon cancer cells secrete exosomes to promote self-proliferation by shortening mitosis duration and activation of STAT3 in a hypoxic environment. Cell Biosci. 2019 Aug 6;9:62.

        [3]. Yoshida K, Tsuda M, Matsumoto R, et al. Exosomes containing ErbB2/CRK induce vascular growth in premetastatic niches and promote metastasis of bladder cancer. Cancer Sci. 2019 Jul;110(7):2119-2132.

        [4]. Liu Hao,Marquez Rebecca T,Wu Xiaoqing et al. A non-intrusive evaluation method for tumor-targeting characteristics of nanomedicines based on in vivo near-infrared fluorescence imaging. J Mater Chem B, 2019, 7: 4751-4757.

        [5]. Tang Yixuan,Wang Xiaoyou,Li Jie et al. Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a "Don't-Eat-Us" Strategy. ACS Nano, 2019, 13: 13015-13026.

        [6]. Wiklander O P B, Nordin J Z, O"Loughlin A, et al. Extracellular vesicle in vivo biodistribution is determined by cell source, route of administration and targeting. J Extracell Vesicles. 2015 Apr 20;4:26316.

         

        關鍵詞:
        外泌體、外泌體示蹤、外泌體功能實驗、外泌體提取
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        發布時間:2021-08-11 17:21:10

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