重生之玩遍女明星目录,庙中求子被僧人C燕氏,辣文小寡妇,性奴大乳清纯校花调教记

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      1. 質譜技術

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        血液蛋白質組全譜分析
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        血液蛋白質組全譜分析

        外周血中的蛋白質高度復雜,動態范圍達11-12個數量級。 為獲得高質量的外周血蛋白質組數據,華盈生物在檢測方法上進行了創新升級,將質譜技術與抗體芯片技術進行整合,充分發揮兩種技術對于不同豐度蛋白的檢測特點....
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        蛋白質組學
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        產品描述

              外周血由于采集難度小,一直是疾病標志物研究和臨床診斷應用的主要載體。外周血蛋白標志物的檢測更是能夠監控疾病的動態變化,成為主要的標志物類型。尤其是對于非腫瘤疾病,在沒有CTC細胞和ctDNA作為協同標志物的前提下,外周血中蛋白標志物的篩選與檢測就顯得尤為重要。

              然而,外周血中的蛋白質高度復雜,動態范圍達11-12個數量級,既有以白蛋白(Albumin)為代表的mg級的高豐度蛋白質(占據外周血總蛋白質量的99%),又有以細胞因子為代表的fg級蛋白質。因此,對于外周血蛋白標志物的篩選和研究也充滿著挑戰。

         

         

         
         
         

             

             一般情況下,對于復雜的蛋白質的篩選來說,液相色譜-質譜串聯(LC-MS/MS)技術成為首選。然而,常規LC-MS/MS技術基于bottom-up的篩選策略(將所有蛋白質無差別的酶解成多肽后,同步進入質譜進行檢測),在大量高豐度蛋白存在的情況下,LC-MS/MS往往會更傾向于檢出高豐度蛋白質,對于ng級以下的低豐度蛋白質(尤其是IL-1β、IL-6、INF-γ等重要細胞因子)的檢測能力嚴重不足。

         

         

         

              同時,外周血中的蛋白質來源豐富,既有細胞凋亡脫落的表面蛋白,也有細胞主動分泌的細胞因子,還有多種細胞分泌的外泌體所攜帶的蛋白質等。經過大量實驗數據累積,我們發現在外周血蛋白質組研究如果僅用傳統的LC-MS/MS實驗方案進行篩選,數據始終是片面的。同樣的血漿樣品,用LC-MS/MS和Antibody Array技術所篩選到的蛋白種類和功能類別交叉性很少,而外泌體攜帶的蛋白質既與血漿total蛋白組檢出數據有一定的交集。同時,對于特定類型的蛋白質,外泌體也具有顯著的富集效果(如下圖):

         

        |   華盈生物外周血蛋白質組學分析

              為獲得高質量的外周血蛋白質組數據,華盈生物在檢測方法上進行了創新升級,以盡可能觀測到外周血蛋白質組的全譜,形成了獨特的外泌體蛋白組“1+1+1”體系。

         

        ●   首先,利用FAIMS和TIMS為代表的4D質譜預處理裝置,對進入MS前的離子進行預篩選,簡稱“離子過濾”。通過電場和氮氣源的綜合作用,將特定離子尤其是1價雜離子進行有效去除,提高進入質譜儀的離子純度,進而在傳統LC-MS/MS鑒定深度的基礎上再提高10%-20%的鑒定蛋白譜。

        ●   進一步,華盈生物利用特色的抗體芯片技術對于LC-MS/MS所不能識別的分泌蛋白類型進行補充鑒定,一次性可特異性的檢測500+種蛋白質,極大地豐富了外周血低豐度蛋白譜。

        ●   同時,華盈生物利用在外泌體定量蛋白質組學上的優勢,在獲得高純度外泌體的基礎上,利用LC-MS/MS技術進行深度的外泌體蛋白質組解析,將對于外周血中的蛋白譜,尤其是外泌體攜帶的母本細胞的膜蛋白譜進行更加全面的覆蓋。

         

        |   經典案例

              國家蛋白質組中心研究團隊發現銀屑病治療中成藥“銀屑靈”在臨床上對不同患者療效存在差異性,為在治療前幫助臨床醫生找到“銀屑靈”的適應患者,研究人員利用深度蛋白質組學技術(LC-MS/MS 結合 Antibody Array)的策略開展用藥伴隨標志物研究。

         

         

              研究結果顯示:利用LC-MS/MS的DIA技術篩選到的蛋白質與Antibody Array篩選到的蛋白質的種類具有明顯的分界線,即LC-MS/MS篩選到的蛋白譜主要集中在血清中ng級以上的蛋白質群體,而Antibody Array篩選到的蛋白譜主要集中在ng-pg級的蛋白質群體中。同時,兩種技術均發現了一些“銀屑靈”差異響應(Responder  vs  Non-responder)蛋白質,組合兩種技術篩選到的蛋白標志物可以更為有效地對“銀屑靈”差異響應患者進行區分。

         

         

        |   相關文獻

        [1]. Xihao Du, Qingli Zhang, Yixuan Jiang,et al. Dynamic molecular choreography induced by traffic exposure: A randomized, crossover trial using multi-omics profiling. J Hazard Mater. 2022 Feb 15;424(Pt A):127359.

        [2]. Meng Xu, Jingwen Deng, Kaikun Xu, et al. In-depth serum proteomics reveals biomarkers of psoriasis severity and response to traditional Chinese medicine. Theranostics, 2019, 9(9):2475-2488.

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        發布時間:2021-08-11 17:21:10

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